产品名称:贾第虫通用LAMP试剂盒
产品特点:贾第虫通用LAMP试剂盒上海一研生物相关产品:2-溴-5-吡分子式:173.01英文名称:2- -5- amino pyridine:13534-97-9分子量: C5H5BrN2
3-溴-2-硝吡分子式:202.99英文名称:3- -2- nitro pyridine:54231-33-3分子量: C5H3BrN2O2
吡虫啉分子式:255.66英文名称:Imidaclopr
产品型号:50次
更新日期:2021-02-07
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50次贾第虫通用LAMP试剂盒的详细资料:
使用方法:
一、样品DNA 的制备
用自选方法提取Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
参数规格:
产品名称 |
贾第虫通用LAMP试剂盒 |
英文名称 |
Universal lamp kit for Giardia |
规格 |
50次 |
储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
检测步骤:
一、试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂每个反应加入的量N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物1 µL N×1 µL
总量15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
1-Boc-4-分子式:210.27英文名称:1-Boc-4- cyano piperidine:91419-52-2分子量: C11H18N2O2
5-并咪唑分子式:133.15英文名称:5- aminobenzimidazole:934-22-5分子量: C7H7N3
N-乙-4-甲酸甲酯分子式:英文名称:N- ethyl -4- methyl piperidine:分子量:
2-溴-5-吡分子式:173.01英文名称:2- -5- amino pyridine:13534-97-9分子量: C5H5BrN2
3-溴-2-硝吡分子式:202.99英文名称:3- -2- nitro pyridine:54231-33-3分子量: C5H3BrN2O2
吡虫啉分子式:255.66英文名称:Imidacloprid:138261-41-3分子量: C9H10ClN5O2
2,3-二甲氧吡分子式:139.15英文名称:2,3- two a:52605-97-7分子量: C7H9NO2
9B,11B-环氧-16B-甲孕甾-1,4-二-17A,21-二-3,20-二酮英文名称:9B, 11B-, -16B-, -17A, -1,4-, 21-, -3,20- two,,分子式:370.44分子量: C22H28O5:981-34-0
人参皂苷Rf11英文名称:Ginsenoside Rf11分子式:分子量::sdfsg
贾第虫通用LAMP试剂盒大鼠CD157 / BST1 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
重组人TNF-alpha / TNFA 蛋白
狗IL12B 基因全长ORF克隆
人CD22 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
小鼠CD163 基因全长ORF克隆
小鼠IL17F 基因全长ORF克隆
小鼠CD5L ELISA配对抗体
人MAP7 基因全长ORF克隆
小鼠DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人HER3 / ErbB3 ELISA配对抗体
人HIF1A 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
人SPINT2 / HAI-2 基因全长ORF克隆
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