细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

下列是产品的订购信息：

产品名称	EC871214细胞，人食管癌细胞说明书
英文名称	EC871214 cells, human esophageal cancer cells
货号	EY-X63615

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

奥拉坦CAS 62613-82-8 规格：100mg 订购|咨询

CAS 20977-05-3 规格：HPLC≥98%，20mg/vial 订购|咨询

富马酸卢帕他定CAS 规格：100mg 订购|咨询

木犀草苷;木犀草素-7-O-葡萄糖苷;青 CAS 1268798 规格：HPLC≥98%,20mg/支 订购|咨询

剑皂苷元CAS 77-60-1 规格：20mg 订购|咨询

山橿根CAS 规格：0.4g 订购|咨询

钩藤碱CAS 76-66-4 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

氢高乌甲素CAS 97792-45-5 规格：20mg 订购|咨询

钩吻素子CAS 规格：HPLC≥98%,20mg/支; 订购|咨询

原百部次碱CAS 169534-85-4 规格：HPLC≥98%;10mg 订购|咨询

穿山甲CAS 规格：1g 订购|咨询

EC871214细胞，人食管癌细胞说明书NEEP21蛋白抗体 英文名称：NEEP21 0.2ml

磷酸化受体2B抗体 英文名称：Phospho-NMDAR2B (Ser1480) 0.1ml

磷酸化受体2B抗体 英文名称：Phospho-NMDAR2B (Ser1303) 0.1ml

NADH氧化还原酶辅酶10抗体 英文名称：NDUFA10 0.2ml

膜相关的蛋白质HEM2抗体 英文名称：NCKAP1 0.2ml

磷酸化KB抑制蛋白β抗体 英文名称：Phospho-IKB beta (Ser23) 0.1ml

跨膜受体蛋白Notch-2抗体 英文名称：Notch 2 0.1ml

磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体 英文名称：Phospho-NFKB1 (Ser903) 0.1ml

泛素样蛋白NEDD8抗体 英文名称：NEDD8 0.2ml膜受体蛋白Notch-2抗体 英文名称：Notch 2 0.1ml

磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体 英文名称：Phospho-NFKB1 (Ser903) 0.1ml

泛素样蛋白NEDD8抗体 英文名称：NEDD8 0.2ml

核因子1C型抗体 英文名称：NFIC 0.2ml

核因子1C型抗体 英文名称：NFIC 0.2ml

磷酸化神经细胞正五聚体1抗体 英文名称：phospho-NPTX1(Tyr344) 0.1ml