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土壤过氧化氢酶(S-CAT)操作步骤
点击次数:725 更新时间:2021-09-01

土壤过氧化氢酶(S-CAT)试剂盒操作步骤:


1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

泛素激活酶E1抗体

表皮生长因子受体抗体

Ets转录因子家族ets1抗体

早期B淋巴细胞因子1抗体

内皮素受体A抗体

表皮生长因子受体抗体

表皮生长因子受体抗体

早期生长应答蛋白1抗体

表皮膜蛋白1抗体

内皮细胞受体蛋白激酶A抗体

蛋白激酶A4抗体

前列腺素E受体3抗体

雌激素受体α抗体

ENPP3抗体IgG

丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体

胚胎干细胞RAS蛋白抗体

转录因子ETV7抗体

ELAVL1抗体

胚胎干细胞相关转录因子1抗体

表皮生长因子受体III型突变体抗体

红细胞膜蛋白条带EPB41L5抗体

早期发育调控蛋白1抗体

转录因子ETV6抗体

跨膜通道蛋白8抗体

尤文氏肉瘤相关EWS蛋白抗体

核酸外切酶1抗体

多发性肌炎/硬皮病自身抗原抗体2抗体


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