大鼠血管紧张素转换酶(ACE)elisa试剂盒基本信息简介
ACE 是一种膜结合糖蛋白分子,分子量为150000。含锌属二肽羧肽酶能使血管紧张素I(十肽由肾素转化而来)肽链C,末端的和残基水解形成具有增压作用的血管紧张素II(八肽) 后者通过与血管气管平滑肌作用引起血管支气管收缩ACE 也具有降血压作用。并参与缓激肽P 物质等多肽性炎性物质的灭活ACE 还能直接作用于肾上腺皮质促进醛固酮分泌因此ACE 是肾素血管紧张素醛固酮系统以及缓激肽系统的重要调节因素影响人体多种生理机能ACE分布于全身各组织,zui高为十二指肠胰卵巢主动脉甲状腺脾肾与肝的含量甚微此外巨噬细胞单核细胞人胎膜胎盘羊水和脐静脉血也含此酶各组织ACE 主要定位于毛细血管内皮细胞由于肺组织具有丰富的血管床且肺毛细血管床内皮细胞所含的ACE 位于细胞外(外周血管床内皮细胞所含的ACE 位于细胞内)。促使血管紧张素I 转化为血管紧张素II 的作用强且肺循环是体内*不使血管紧张素II 灭活的血管床肺循环流出的血液中血管紧张素II 的含量zui高一般认为血管内皮细胞的ACE 与胞膜密切结合几乎不释放ACE 而巨噬细胞和单核细胞产生的ACE 大部分释放入血故当ACE 升高时应考虑为巨噬细胞,单核细胞系统的分泌亢进多数报道血清ACE 活性无性别年龄吸烟体位时间变化清醒睡眠状态不影响ACE 的活性早产儿足月儿新生儿及健康成人的血清ACE 活性无明显差别但李平生等 Ucer G.报道ACE 活性男大于女Ucer G.(1)等报道血清ACE 活性与吸烟年龄性别有关,与氧分压呈负性相关。
大鼠血管紧张素转换酶(ACE)elisa试剂盒操作方法简介
1、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
2、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
3、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
4、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
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