抗Ⅲ抗体Elisa试剂盒结合物即酶标记的抗体(或抗原),是ELISA中zui关键的试剂。良好的结合物应该是既保有酶的催化活性,也保持了抗体(或抗原)的免疫活性。结合物中酶与抗体(或抗原)之间有恰当的分子比例,在结合试剂中应尽量不含有或少含有游离的(未结合的)酶或游离的抗体(或抗原)。此外,结合物尚要有良好的稳定性。
用于ELISA的酶应符合以下要求:纯度高,催化反应的转化率高,专一性强,性质稳定,来源丰富,价格不贵,制备成酶结合物后仍继续保留它的活性部分和催化能力。在受检标本中不存在相同的酶。另外,它的相应底物易于制备和保存,价格低廉,有色产物易于测定等。 在ELISA中,常用的酶为辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)和碱性磷酸酶(alkaline phosohatase, AP)。在少数商品ELISA试剂中,应用的酶尚有葡萄糖氧化酶、β-D-半乳糖苷酶和脲酶等。 国产ELISA试剂一般都用HRP制备结合物。HRP是一种糖蛋白,含糖量约为18%,分子量为44000,是一种复合酶,由主酶(酶蛋白)和辅基(亚铁血红素)结合而成,是一种卟啉蛋白质。主酶无色糖蛋白在275nm波长处有吸收峰,辅基是深棕色的含铁卟啉环,在403nm波长处有吸收峰。HRP的纯度用RZ(Reinheit Zahl,德文,意为纯度数)表示,是403nm的吸光度与280nm吸光度之比,高纯度的HRP的RZ≥9.0。 HRP除符合上述的ELISA中标记酶的要求外,更有价格低廉和性质较稳定的特点。值得注意的是,在选用酶制剂时,除其纯度RZ外,更应注意酶的活力。高纯度的酶如保存不当,活力也会降低。酶制剂的活力以所含的酶活力单位表示,可用对底物作用后生成产物量的测定进行试验。
国外很多抗Ⅲ抗体Elisa试剂盒试剂采用碱性磷酸酶(AP)作为标记酶。常用的AP有两个来源,分别从大肠杆菌和小牛肠膜中提取。不同来源的酶生化特性特性略不相同,从大肠杆菌中提取的AP分子量为80000,酶作用的pH为8.0;用小牛肠膜中提取的AP分子量为100000,zui适pH为9.6。在ELISA中,AP系统的敏感度一般高于HRP系统,空白值也较低,但AP价格昂贵,制备结合物所得率也较HRP低。
300mg 78439-06-2 五水合物标准品 Ceftazidime Pentahydrate
300mg 类姜黄素标准品 Curcuminoids
300mg 5870-29-1 盐酸环喷托酯标准品 Cyclopentolate Hydrochloride
300mg 2438-32-6 马来酸右标准品 Dexchlorpheniramine Maleate
300mg 562-10-7 琥珀酸多西拉敏标准品 Doxylamine Succinate
300mg 8067-24-1 甲磺酸双氢麦角碱标准品 Ergoloid Mesylates
300mg 13517-23-2 依替膦酸钠相关物质A标准品 Etidronate Disodium
300mg 75607-67-9 标准品 Fludarabine Phosphate
抗Ⅲ抗体Elisa试剂盒