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抗Ⅲ抗体Elisa试剂盒甲状腺冰冻切片操作方法
点击次数:969 更新时间:2017-01-10

抗Ⅲ抗体Elisa试剂盒?甲状腺冰冻切片操作方法

1. 主要试剂与仪器

0.5%氨水返蓝液抗Ⅲ抗体Elisa试剂盒?、Gill改良苏木精染液、0.5%~1%盐酸乙醇分化液、1%醇溶性伊红染液、甲醇醋酸混合固定液(甲醇50ml、冰醋酸2.5ml)、各梯度乙醇溶液、二甲苯及中性树胶均

2.操作方法

冷冻机温度为-15℃~-18℃。将新鲜活体组织块切成1.5cm×1.5cm×0.3cm大小,速冻,切片厚度为5μm。粗修组织块,然后细修切面,再用戴手套手的大拇指或大鱼际肌在切面上温暖2~3s,动作稍慢而匀速。抗Ⅲ抗体Elisa试剂盒?切片制成后立即放入甲醇醋酸混合固定液固定0.5~1min后水洗,Gill改良苏木精染胞核1~3min后水洗,0.5%~1%盐酸乙醇分化液分化1~2次后水洗,0.5%氨水返蓝2s后水洗,1%醇溶性伊红染胞质10s,逐级梯度乙醇快速脱水,中性树胶封固[1-2]。

3.结果

3.1 取材浸水对组织HE染色效果的影响

组织浸水后镜下出现冰晶及类似气泡样的“黑水珠”,按压不会消失;未浸水组织结构完整,未见上述现象。

3.2 冷冻温度对组织

冷冻温度过低时,镜下出现甲状腺胶质染色不均匀,甚至出现多量大小不一的空泡;温度适宜时,组织结构清晰完整、细胞无明显膨胀、极少有冰晶形成。

3.3 复温对组织

HE染色效果未复温时,镜下显示滤泡与滤泡之间出现收缩裂隙;复温后无收缩裂隙情况出现。

3.4 固定液对组织

固定液中未加冰醋酸时,镜下显示胶质收缩,皱褶形成,胶质与滤泡上皮脱落,出现空晕;加冰醋酸后,组织结构清晰,核着色清楚,核浆对比度好,组织无皱缩现象发生。

3.5 染色对组织

抗Ⅲ抗体Elisa试剂盒?染色不充分时,镜下显示组织色泽偏红,核对比度不强,影响诊断;染色充分后,镜下组织结构清晰完整,核浆红蓝对比鲜明。

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