产品列表PROUCTS LIST
新闻动态NEWS
技术文章Article 当前位置:首页>技术文章> 详细内容
关于ELISA试剂盒测抗原的竞争法
点击次数:877 更新时间:2016-11-03

关于ELISA试剂盒测抗原的竞争法

ELISA试剂盒当抗原材料中的干扰物质不易除去,或不易得到足够的纯化抗原时,可用此法检测特异性抗体。其原理为标本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合。标本中抗体量越多,结合在固相上的酶标抗体愈少,因此阳性反应呈色浅于阴性反应。如抗原为高纯度的,可直接包被固相。如抗原中会有干扰物质,直接包被不易成功,可采用捕获包被法,即先包被与固相抗原相应的抗体,然后加入抗原,形成固相抗原。洗涤除去抗原中的杂质,然后再加标本和酶标抗体进行竞争结合反应。竞争法测抗体有多种模式,可将标本和酶标抗体与固相抗原竞争结合,抗HBc ELISA一般采用此法。另一种模式为将标本与抗原一起加入到固相抗体中进行竞争结合,洗涤后再加入酶标抗体,与结合在固相上的抗原反应。抗HBe的检测一般采用此法。
实验步骤
1. 以稀释液将待检标本做适当稀释(预试中确定)加入包被有已知抗原的酶标板中(50ul/孔),加封口胶带于37℃作用30min。
2. 弃反应液,以冲洗液连续洗板5次并于吸水纸上拍干。
3. 加入酶标抗体(浓度在预试中确定)。加封口胶带后于37℃作用30min。
4. 重复第2步。
5. 加底物(浓度在预试中确定),加封口胶带后于室温下避光作用5-60 min,其间不时观察,显色满意后加终止液50ul/孔。
6. 于酶标仪测定OD值,OPD用492nm测定,TMB用450nm测定。

上一篇 ELISA试剂盒的形态种类下一篇 elisa试剂盒对结核病的感染测试

上海一研生物科技有限公司 总流量:353783GoogleSitemapICP备案号:沪ICP备14030958号-9
电话:021-69985186 手机:15021460884 联系人:吴先生 邮箱:3004979817@qq.com

收缩
  • 在线咨询
  • 点击这里给我发消息
  • 点击这里给我发消息
Baidu
map