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Elisa实验类型选择
点击次数:769 更新时间:2016-08-29

Elisa实验类型选择
酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked Immunosorbent Assay, ELISA) 技术从1970年代发展至今已近半个世纪,是一项实验室zui基本的免疫检测技术,被广泛的应用于基础研究和临床检验。那么面对市面上数以千计的试剂盒,数百家供应商,对于刚进入实验室的新手或者准备开展ELISA实验的人员, 又该如何选择且质量又可靠的ELISA试剂盒呢?
1. 首先选定ELISA类型
ELISA技术可用于测定抗原,也可用于测定抗体。牛ELISA检测试剂盒 ELISA方法中有三个必要的试剂:(1) 固相的抗原或抗体,即"免疫吸附剂"(immunosorbent);(2) 酶标记的抗原或抗体,称为"结合物"(conjugate);(3) 酶反应的底物。
一般可将ELISA分为以下几种类型,实验君首先需要根据自己的待检物来确定试剂盒类型。
1) 双抗体夹心法:针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相捕获抗体和酶标检测抗体。适用于测定二价或二价以上的大分子抗原如血浆中的细胞因子,不适用于测定半抗原及小分子单价抗原。同理,也有双抗原夹心法测抗体。
2) 直接法:将抗原直接固定在固相载体上,加入酶标记的一抗,即可测定抗原总量。此法操作手续简短,因无须使用二抗可避免交互反应。
3) 间接法:间接法是检测抗体常用的方法,其原理为利用酶标记的抗抗体(抗抗体)来检测与固相抗原结合的待检抗体。
4) 竞争法:小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点,因此不能用双抗体夹心法进行测定,可以采用竞争法模式。当抗原材料中的干扰物质不易除去,或不易得到足够的纯化抗原时,可用此法检测特异性抗体。

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