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ELISA试剂盒包被条件的优化
点击次数:948 更新时间:2016-04-13
ELISA试剂盒包被条件的优化:
1.包被液的选择:一般常用的是pH9.6的碳酸盐缓冲液,如果包被的抗原在碱性条件下不稳定的话,也可以使用pH7.2的磷酸盐缓冲液。
2.包被浓度的选择:包被的zui适浓度随固相载体和包被物的性质变化,一般蛋白质的包被浓度为1- 5ug/ml,要明确针对特定包被抗原的zui适包被浓度需要通过实验来确定。
3.包被温度的选择:通常是4-8度条件下放置一个晚上或者37度保温2小时,我们强烈建议4-8度条件下包被,有利于蛋白活性的保持。
4.包被抗原的选择:可分为天然蛋白、重组蛋白和小分子抗原三大类。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有机化合物,由于分子量太小,往往难于直接吸附在酶标板上,一般都先使其与无关蛋白质,比如BSA等偶联,偶联物吸附于固相载体上。