1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。
硫化亚铁;硫化铁Iron sulfide1317-37-9
氯化高铁(阴凉);氯化铁;三氯化铁;氯化高铁Iron(III) chloride solution;Iron (III) chloride hydrated;Iron(III) chloride;Ferric salts10025-77-1
依思明蓝IsaMin blue;Brilliant sky blue 5G;C.I. 427001324-86-3
靛红Isatin91-56-5
乙酸异戊酯;醋酸戊酯;醋酸异戊酯;香蕉水;香蕉油;异戊酯IsoaMyl acetate;γ-Methylbutyl ethanoate;Banana oil;AMyl acetate;Pear oil;3-Methyl-1-butanol acetate123-92-2
异戊醇;3-甲基-1-丁醇;异丁原醇IsoaMyl alcohol;Isobutylcarbinol;Isopentyl alcohol;IsoaMyl alcohol priMary123-51-3
异戊胺;异丁基甲胺;3-甲基丁胺;1-氨基-3-甲基丁烷IsoaMylaMine;3-MethylbutylaMine;1-AMino-3-Methylbutane;3-Methyl-1-butanaMine,IsopentylaMine107-85-7
乙酸异丁酯Isobutyl acetate110-19-0
氯甲酸异丁酯;氯蚁酸异丁酯;氯碳酸异丁酯Isobutyl chloroforMate543-27-1
甲酸异丁酯;蚁酸异丁酯Isobutyl forMate542-55-2
异丁胺;1-氨基异丁烷;2-甲基丙胺IsobutylaMine;1-AMinoisobutane;2-Methyl propylaMine78-81-9
异丁酸;2-甲基丙酸;二甲基乙酸;异丙基甲酸Isobutyric acid;IsopropylforMic acid;DiMethylacetic acid79-31-2cyclohexene-1-one;Isoacetophorone78-59-1
乙酸异丙酯;醋酸异丙酯Isopropyl acetate108-21-4
肉豆蔻酸异丙酯;十四酸异丙酯;十四酸1-甲基乙基酯Isopropyl Myristate;Isopropyl tetradecanoate110-27-0
4-氯间甲酚4-Chloro-3-methylphenol59-50-7
异丙基环己烷;六氢异丙苯;六氢枯烯;2-环己基丙烷Isopropylcyclohexane;HexahydrocuMene;2-Cyclohexylpropane696-29-7
异喹啉 97%Isoquinoline119-65-3
异戊醛;3-甲基丁醛;异缬草醛Isovaleraldehyde;3-Methylbutyraldehyde;Isovaleric aldehyde;3-Methyl butanal590-86-3
衣康酸;亚甲基琥珀酸;2-亚甲基丁二酸;分解乌头酸Itaconic acid;Propylenedicarboxylic acid97-65-4