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鼠抗人肥大细胞类单克隆抗体的制备过程
点击次数:450 更新时间:2022-06-14

鼠抗人肥大细胞类单克隆抗体的制备过程:

1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫动物:常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集:一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。

4. 免疫血清的纯化与鉴定:得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。

5. 免疫血清的保存:抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。

SW626(人卵巢癌细胞)

T-24(人膀胱癌细胞)

T-47D(人乳腺管癌细胞)

T84(人结肠腺癌肺转移细胞)

Tca-8113(人舌鳞癌细胞)

TE-1(人食管癌细胞)

TF-1(人血液白血病细胞)

THP-1(人髓系白血病单核细胞)

TM3(小鼠睾丸间质细胞)

TSCCa(人舌鳞癌细胞)

U-2 OS(人骨肉瘤细胞)

U251(人胶质瘤细胞)

U-87 MG(人神经胶质瘤细胞)

U-937(人组织细胞淋巴瘤细胞)

V79(仓鼠肺细胞)

VCaP(人前列腺癌细胞)

Vero(非洲绿猴肾细胞)

WI-38(人胚肺细胞)

WISH(人羊膜细胞)

Y1(Y-1) (小鼠肾上腺皮质细胞)

YAC-1(小鼠淋巴瘤细胞)

ZR-75-1(人乳腺癌细胞)

ZR-75-30(人乳腺癌细胞)


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